1、生化试剂盒的标准曲线怎样制作？
1) 生化试剂盒中的标准品/标曲，建议做复孔，并计算每个浓度标准品的平均OD值；
2) 将不同浓度标准品的平均OD值减去空白孔（标准品浓度为0时）的平均OD值，得到绝对OD值；
3) 以不同浓度标准品为 X 轴，绝对OD值为 Y 轴，利用Excel/Origin软件作图，并进行拟合，得到标准曲线。
2. 针对某个生化试剂盒，是否可以只做一次标曲？
由于每次实验环境，操作手法等这些因素都是有差异的，标曲的实际情况也会不同，建议每次实验重新制作标准曲线，以便得到更准确、可靠的检测结果。
3. 自己做的标曲需要跟说明书上的完全一致吗？
说明书上的标曲是作为技术参数的指示标曲，主要是用于
呈现拟合后标曲的形态以及最高/最低OD值的质控范围。由于受实验操作、实验环境以及检测仪器等因素的影响，客户实际做得的标曲可能会跟说明书不太一致，但标曲的相关系数在0.99以上即可作为有效标曲使用。
3. 为什么同一样本平行测定结果差异大（复孔差异大）？
1) 样本原因：样本体系不均匀、样本提取时离心不完全、杂质等原因。
2) 仪器原因：仪器不稳定造成系统误差大，一般仪器需要预热30分钟后再进行比色检测。
3) 操作原因：复孔差异大主要是由操作误差引起的，建议实验操作时，小心取样，小心加液，注意移液枪的使用手法，尽量保持操作的一致性。
4. 样本为什么不显色，OD值很小？
1) 样本中确实不含有该指标或者指标含量太低导致的。
2) 前处理不当：例如测定酶活，使用了导致酶失活的化学试剂等。
3) 样本保存不当或提取方法不当等。
4) 试剂保存不当，包括保存温度、放置太久过期了等，导致试剂盒中某些试剂失效。
5. 数据变化趋势不符合预期？
1) 先查找实验技术问题，以及计算公式和单位有没有问题；
2) 再找样本质量有没有问题；
3) 若两者都没有问题，就要思考实验方案，有时不符合预期的结果反而意味着研究的新意，甚至是新发现。
4) 如果选择了测定系列指标，就可以通过相关指标的变化趋势是否一致，来判断该指标的变化是否正常，因为同时几个相关指标变化都不正常的可能性比较小。